Engpässe auflösen in der Antikörperentwicklung
Vom Forschungswerkzeug bis zum zugelassenen Therapeutikum haben Antikörper Wissenschaft und Medizin verändert. Der Weg von der Immunisierung zum validierten Antikörper bleibt trotzdem langsam und ressourcenintensiv.
- Das Hybridom-Screening ist mühsam und anfällig für genetische Drift.
- Die B-Zell-Sequenzierung ist teuer und und sagt früh nichts über die Funktion.
- Die rekombinante Antikörperherstellung steht und fällt mit stabilen, hochtitrigen monoklonalen Linien.
Solche Verfahren brauchen meist umfangreiche nachgelagerte Assays , um funktionsfähige Antikörper zu finden – Zeit und Material gehen dabei für unproduktive Zellen drauf.
CellRaft-Technologie: Antikörper klüger finden
Die CellRaft-Technologie stellt den üblichen Screening-Trichter auf den Kopf. Statt blind zu screenen, können Sie:
- Antikörpersekretion und Spezifität direkt auf dem Array nachweisen
- Zehntausende Einzelzellen in einem kompakten Verbrauchsartikel screenen
- Nur die Klone isolieren, auf die es ankommt – das spart Zeit und Material in allen folgenden Schritten
Mit Assays direkt im Raft und frei wählbarem Fluoreszenzauslesen lassen sich generisches IgG und antigenspezifische Antikörper im selben Mikrowell nachweisen – auf Einzelzellebene.
Anwendungen entlang der Antikörperentwicklung
Holen Sie verlorene Produktivität aus schwachen oder instabilen Klonen zurück. Gemeinsam mit Tetracore wurde der CellRaft AIR® eingesetzt, um hochproduktive Klone aus einer Population zu gewinnen, in der nur noch 0,1 % der Zellen Antikörper produzierten. Alle gewonnenen Klone produzierten mehr als zehnmal so viel Antikörper wie die Ausgangslinie und machten ein eingestelltes kommerzielles Kit wieder brauchbar.
Der Nutzen:
- Seltene Antikörperproduzenten finden (< 0,1 % der Population)
- Abgedriftete Klone vermeiden
- Sekretion prüfen, bevor expandiert wird
Ablauf des Hybridom-Screenings
Sparen Sie sich den Umweg über die Sequenzierung. Setzen Sie CellRaft AIR ein, um antigenspezifische B-Zellen von vornherein zu erkennen und zu isolieren.
Gemeinsam mit der Duke University hat Cell Microsystems 250.000 primäre Plasmazellen der Maus gescreent, um antigenspezifische Zielsequenzen zu finden. Die daraus hergestellten rekombinanten Antikörper erreichten dieselbe Spezifität wie kommerzielle Antikörper.
Der Nutzen:
- Zehntausende seltener, sich nicht teilender Plasmazellen screenen
- Antigenspezifische Sequenzen finden, bevor in Expressionsvektoren investiert wird
- Sequenzierkosten senken, indem zuerst auf funktionsfähige Treffer angereichert wird
Ablauf des Einzel-B-Zell-Screenings
Expression allein sagt nichts über Funktion. Setzen Sie CellRaft AIR ein, um Ihre besten Produzenten früh zu finden. Selbst unter stabil transduzierten, durchflusszytometrisch angereicherten Zellen sezerniert nur ein Bruchteil Antikörper in einer Menge, die sich hochskalieren lässt.
Der Nutzen:
- Produktivität polyklonaler Populationen bewerten und daraus monoklonale Produktionszelllinien ableiten
- Die besten Klone nach ihrer Sekretion auswählen, nicht nach Transfektionsmarkern
- Keine funktionslosen Klone expandieren
Ablauf der Produzentenauswahl
So arbeitet das System
ELISA im Kleinformat
Antikörpersekretion vor Ort nachweisen, mit fluoreszenten Fängerreagenzien.
Bildbasierte Zytometrie
Mit der CellRaft-Cytometry-Software vitale, antigenspezifische Zellen erkennen.
Isolierung ohne Fluidik
Zellen auf biokompatiblen Rafts gewinnen und direkt expandieren oder sequenzieren.
Passt ins 96-Well-Format
Fügt sich in ELISA-, Sequenzier- und Produktionsabläufe ein.
Die Vorteile auf einen Blick
Dass Zellen nach der Gen-Editierung zu klonalen Kolonien heranwachsen, ist ein wesentlicher Teil des Ablaufs. Mit demCellRaft AIR®lassen sich Einzelzellen während der Koloniebildung abbilden und verfolgen. Zusätzlich lässt sich der Knockout-Phänotyp (Verlust des GFP- und RFP-Signals) über die Zeit mitverfolgen – das eröffnet ein phänotypisches Screening der Gen-Editierung.
Merkmal | Herkömmliche Verfahren | CellRaft AIR System |
|---|---|---|
Durchsatz | 1.000 Zellen auf 10 Platten | 40.000 Zellen je Array |
Screening nach Funktion zuerst | ❌ | ✅ |
Klonverfolgung | ❌ | ✅ |
Medienverbrauch | ~4.000 ml für 10 Platten | ~3 ml je Array |
Handarbeitszeit | Dutzende Stunden | ~21 Stunden je Kampagne insgesamt |
Skalierbarkeit | begrenzt | 1 bis über 10 Arrays |
Schneller anfangen? Wir übernehmen das für Sie.
Unser Applikationsteam bietet Laborleistungen an – wir:
- retten Klone
- screenen Hybridome oder Plasmazellen
- entwickeln maßgeschneiderte antikörperexprimierende Zelllinien
Wenn Sie so weit sind, holen wir den Ablauf mit Schulung und Unterstützung zu Ihnen ins Haus.