Tumorsphäroid-Assays in Echtzeit
Wachstum von Tumorsphäroiden und Abtötung durch Immunzellen in 3D quantifizieren – mit Bildgebung in Echtzeit am xCELLigence RTCA eSight.
Zell- und Gentherapien haben die Behandlung hämatologischer Krebserkrankungen grundlegend verändert; ihre Übertragung auf solide Tumoren bleibt jedoch schwierig. Fortschrittliche 3D-Zellmodelle in Kombination mit quantitativer Bildgebung in Echtzeit eröffnen heute tiefere Einblicke in die Tumorbiologie und in die Immunzell-vermittelte Abtötung.
Warum 3D-Tumorsphäroide?
In vitro schließen 3D-Kulturen die Lücke zwischen herkömmlichen 2D-Assays und Tiermodellen. Tumorsphäroide bilden die in vivo vorliegende Gewebearchitektur genau nach und erfassen dabei wesentliche Merkmale wie:
- Zell-Zell- und Zell-Matrix-Wechselwirkungen
- Hypoxie und zentrale Nekrose
- Wirkstoffpenetration und Resistenz
- Bildung und Umbau der extrazellulären Matrix (ECM)
Diese physiologisch relevanten Modelle liefern aussagekräftigere Daten für Immunonkologie und Wirkstoffforschung.
Quantitative 3D-Analyse in Echtzeit
Die Zellanalyse-Lösungen von xCELLigence bieten belastbare Arbeitsabläufe, um die durch Immunzellen bewirkte Hemmung von 3D-Tumorwachstum und -Invasion zu verfolgen. Inkubation, Bildgebung und Auswertung sind integriert und ermöglichen kinetische Langzeitversuche mit wenig Handarbeit und hoher Reproduzierbarkeit.
- Live-Cell-Imaging, um 3D-Tumorwachstum und -Invasion in Echtzeit zu verfolgen
- Markierungsfreie Bildgebung oder einfache Mix-and-Read-Reagenzien zur Beurteilung von Proliferation und Zytotoxizität
- Quantitative Einblicke in Morphologie und Zelldynamik in Mono- und Kokulturmodellen
- Einfache, reproduzierbare Readouts zu Viabilität und Toxizität für tiefere biologische Erkenntnisse
- Physiologisch relevante Abbildung von Tumorheterogenität und Tumormikroumgebung
Automatisierter Assay zur Messung der CAR-T-Zell-vermittelten Abtötung in 3D-Krebsmodellen
Adoptive Zelltherapien, darunter chimäre Antigenrezeptor-T-Zellen (CAR-T-Zellen), haben die Krebsimmuntherapie von Grund auf verändert. Um ihre Wirkung in soliden Tumoren besser zu verstehen, wurde die CAR-T-Zell-vermittelte Abtötung in physiologisch relevanten 3D-Krebsmodellen quantifiziert.
Gentechnisch veränderte T-Zellen, die gegen EpCAM (CD326) gerichtet sind, werden in Echtzeit verfolgt. So lassen sich zytotoxische Aktivität, räumliche Wechselwirkungen und Therapiewirksamkeit in 3D-Tumorumgebungen detailliert analysieren.
Kontinuierliche Echtzeitverfolgung der Abtötung von 3D-Tumorsphäroiden mit dem xCELLigence RTCA eSight
Der xCELLigence RTCA eSight macht die Immunzell-vermittelte Abtötung in 3D-Tumorsphäroiden kontinuierlich und in Echtzeit sichtbar und quantifizierbar. In diesem Assay werden HT-1080-Sphäroide aus eLenti-Red-markierten Zellen mit voraktivierten oder nicht aktivierten PBMCs kokultiviert, um die zytotoxische Wirksamkeit über die Zeit zu beurteilen.
Über 10 Tage hinweg wird alle 4 Stunden automatisch im Hellfeld und in der Fluoreszenz aufgenommen; so wird die vom E:T-Verhältnis abhängige Abtötung bei Verhältnissen von 2,5:1 bis 20:1 erfasst. Dieses Vorgehen liefert dynamische, quantitative Einblicke in die Aktivität der Immunzellen, das Therapieansprechen und die Abtötungskinetik in physiologisch relevanten 3D-Krebsmodellen.
3D-Sphäroidwachstum und Immunzell-Killing an Ihren eigenen Zellen verfolgen: automatische Bildgebung alle vier Stunden, über zehn Tage.