Assays zum zytopathischen Effekt
Zytopathische Effekte sind ein quantifizierbares Maß für virale Aktivität. Verfolgen Sie sie über den gesamten viralen Lebenszyklus in Echtzeit — ohne Agar-Overlay, ohne Marker, ohne subjektive Bewertung.
Zytopathische Effekte (CPE) in Echtzeit messen
Die Virusaktivität genau zu verfolgen, ist für die Suche nach antiviralen Wirkstoffen, für die Impfstoffentwicklung und für die Infektionsforschung unentbehrlich. Befallen Viren ihre Wirtszellen, lösen sie häufig zytopathische Effekte (CPE) aus – die Zellen ändern ihre Größe, lösen sich auf, verschmelzen oder zeigen andere kennzeichnende Veränderungen. Wo sie auftreten, sind diese Effekte ein aussagekräftiger, messbarer Wert für virologische Untersuchungen.
Warum xCELLigence RTCA für CPE-Assays
Empfindliche, hoch aufgelöste kinetische Daten über den gesamten Vermehrungszyklus des Virus.
Einfache Abläufe mit hohem Durchsatz, ohne Agarüberschichtung und ohne Markierung.
Weniger Handarbeit und sichererer Umgang mit infektiösen Proben.
Bessere Reproduzierbarkeit, weil die subjektive Bewertung mit dem Auge entfällt.
Die Wirkung antiviraler Substanzen vollständig erfassen über den ganzen Infektionsverlauf
Das xCELLigence RTCA eSight system verbindet Impedanzmessung und Lebendzell-Bildgebung im Multiplex – und zwar direkt im Inkubator. So lässt sich die antivirale Wirkung durchgehend und quantitativ verfolgen, mit allen wichtigen Ereignissen: der Aktivierung antiviraler Signalwege der Wirtszelle, der Apoptose und dem Verlust der Barrierefunktion. Kein Zeitpunkt geht verloren, vom Eindringen des Virus bis zum Zelltod.
Impedanzdaten und Lebendzell-Bildgebung im Multiplex
Die xCELLigence RTCA Geräte (SP, MP, HT) messen den CPE markierungsfrei und ohne Eingriff im 96- oder 384-Well-Format. RTCA eSight ergänzt Hellfeld- und Dreifarben-Fluoreszenzbildgebung – fünf gleichlaufende Datenströme von denselben Zellen. Dieser doppelte Blick macht die Deutung sicherer und den Einblick in das Zusammenspiel von Virus und Zelle tiefer.
Application Note:Virusneutralisierende Antikörper nachweisen und charakterisieren
Impedanz- und bildbasierte Messwerte des eSight zusammen, um den zytopathischen Effekt von Adenovirus-GFP zu verfolgen. (A) Proliferation und zytopathischer Effekt über die Impedanz. (B) Hellfeld, roter Kanal (Wirtszellkerne) und grüner Kanal (viruskodiertes GFP). (C) Nachweis über Impedanz und über das Bild.
Virusneutralisierende Antikörper prüfen und charakterisieren
Neutralisieren heißt mehr, als das Antigen zu binden – es heißt, die Infektion zu verhindern. Impedanzassays auf xCELLigence unterscheiden neutralisierende von nicht neutralisierenden Antikörpern deutlich, indem sie messen, wie gut die Wirtszellen bei unterschiedlicher Viruslast geschützt sind. Bei niedriger MOI (0,4) verhinderte ein lösliches CAR den durch Adenovirus-GFP ausgelösten Zelltod vollständig; bei hoher MOI (222) zeigte es keine Schutzwirkung.
(A) Eine lösliche Domäne des Coxsackie-Adenovirus-Rezeptors (CAR) bindet an das Adenovirus und neutralisiert es. (B, C) Impedanzantwort von 40.000 Zellen je Well, infiziert bei MOI 222 beziehungsweise 0,4, nach Vorinkubation mit oder ohne lösliches CAR.
So funktioniert es
Einfacher und belastbarer Ablauf für antivirale Wirkstoffassays
xCELLigence RTCA weist virusbedingte zytopathische Effekte schnell und empfindlich nach. So lassen sich antivirale Substanzen über den gesamten Vermehrungszyklus finden und charakterisieren. Zielzellen aussäen, Virus und Testsubstanzen in verschiedenen Konzentrationen zugeben – das System nimmt die kinetischen Daten durchgehend und markierungsfrei auf. Der Aufwand und die Wartezeit herkömmlicher Plaque-Assays entfallen.
Technical Overview: Screening and Characterizing Antiviral Drugs
Virusneutralisierende Antikörper schnell und sparsam prüfen
Der schlanke Ablauf auf xCELLigence RTCA ersetzt den arbeitsaufwendigen PRNT-Assay. Wirtszellen aussäen, Virus zusammen mit dem Testantikörper zugeben – das System nimmt sofort auf, ohne Agarüberschichtung und ohne Ablesen von Hand. Neutralisierende Aktivität lässt sich schon nach einer Stunde erkennen, schnell und gut reproduzierbar.
Literatur
Application Notes
Detecting and Characterizing Virus Neutralizing Antibodies in Real Time
A New Way to Monitor Virus-Mediated Cytopathogenicity
Real-Time Specificity and Potency Assessment of Human Papilloma Virus Specific Engineered T Cells
Handbook
Vaccine and Virology Applications
Technical Overview
Screening and Characterizing Antiviral Drugs in Real Time Using xCELLigence RTCA eSight’s Combination of Impedance and Imaging
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren.