Real-Time PCR Aufbaukurs: Genexpressionsanalyse

Dieser Kurs wird auf Deutsch gehalten

Die Kursorganisation erfolgt in Kooperation mit

Inhalte & Lernziele

Die PCR-Methode hat in vielen Bereichen der Molekularbiologie große Fortschritte initiiert. Mittlerweile ist sie unersetzlich und wird in zahlreichen Forschungsbegieten eingesetzt. Genexpressionsanalysen stellen einen speziellen Anwendungsbereich dar und liefern Informationen über die Umsetzung der genetischen Information. Darüber hinaus lässt sich aus Genexpressionsanalysen schnell und präzise ermitteln, wie sich ein oder mehrere Gene unter verschiedenen regulatorischen Bedingungen verhalten. Fast alle Zell- oder Gewebetypen exprimieren unter physiologischen oder verschiedenen Versuchsbedingungen immer nur einen bestimmten Teil aller vorhandenen Gene und diese dann auch in unterschiedlicher Intensität. Viele der insgesamt vorhandenen übrigen Gene ist dagegen konstitutiv „abgeschaltet“. Für quantitative Expressions-Analysen der konstitutiven und induzierten Genregulationen hat sich die reverse Transkription mit anschließender Real-Time PCR bewährt. In diesem Kurs lernen Sie, wie man eine solche Genexpressionsanalyse etabliert, optimiert und das Troubleshooting durchführt.

Themen des Theorie-Seminars

• Aufbau und Struktur von DNA, RNA und Genomen
  

• Exon-Intron-Struktur, Primer-Design für eine optimale Multiplex-Sonden-PCR
  

• Prinzip der Real Time PCR und unterschiedliche Detektionsformate 

• Grundlagen der Real Time PCR: Ct-Werte, Threshold, Baseline
  

• Auswahl und Analyse der geeigneten endogenen Referenz
  

• Relative Quantifizierung mit Standard-Kurve und mittels deltaCT

• Troubleshooting

Themen der Praxis-Schulung

• Präparation von total-RNA, mRNA und deren Quantifizierung
  

• Nachweis der RNA-Integrität mittels PCR und Prüfung der Abwesenheit von gDNA (Alu-PCR)
  

• Methoden der cDNA-Synthese (Oligo-dT, random und Gen-spezifisches Priming)
  

• Bestimmung von Effizienz, Bestimmungswert und Auswahl geeigneter endogener Referenzen
  

• Relative Quantifizierung mit den Kursdaten
  

• Überprüfung auf MIQE-Konformität

Zielgruppe

Technische und wissenschaftliche MitarbeiterInnen, insbesondere aus medizinischen Laboratorien mit soliden Grundkenntnissen in der Molekularbiologie und Zellbiologie

Termine und Preis

Anmeldungen für offene Kurse sind derzeit Corona-bedingt noch nicht möglich. Eine Reservierung kann per E-Mail erfolgen. 

Schulungsort: Bremen

Kurssprache: Deutsch

Termin 2022: 26. bis 28. September 2022

Preis: 1.079 Euro zzgl. MwSt. (1.284 inkl. MwSt.)

Die Kursgebühr bei offenen Schulungen beinhaltet die Verpflegung während des Kurses (Kaffee, Getränke, Mittagessen), sowie Schulungsunterlagen im Farbdruck und ein Teilnahme-Zertifikat nach GMP-Vorgaben.