Real-Time PCR Basiskurs

Dieser Kurs wird auf Deutsch gehalten

Die Organisation erfolgt in Kooperation mit

Inhalte & Lernziele

Die Real-Time PCR (RT-PCR oder qPCR) hat sich als mittlerweile als unersetzliche Standard-Methode für den Nachweis, die Quantifizierung und auch Genotypisierung von DNA/RNA etabliert. Sie ist schnell, präzise und erlaubt hohen Durchsatz. In diesem Kurs lernen sie alles, was sie für eine erfolgreiche RT-PCR Durchführung brauchen. Neben den theoretischen Grundlagen der qPCR, dem allgemeinen Versuchsaufbau und der Auswertung und Interpretation der erzielten Daten, stehen im Kurs drei Experimente modelhaft im Zentrum: die Bestimmung der Nachweis-und Quantifizierungsgrenze (LoQ, LoD), die Genotypisierung mittels HRM und Sonden sowie die relative Quantifizierung in einer Expressionsstudie und ihre Auswertung. 

Themen des Theorie-Seminars

• Prinzip der Real-Time PCR

• Unterschiedliche Detektionsformate

• Geräteplattformen (Eva-Green, Sonden, Multikanal-Detektion mit/ohne ROX)

• Interpretation und Daten-Auswertung: Ct-Werte, Threshold-Setting, Baseline, Schmelzkurve, Methoden der Effizienz-Bestimmung und Rechnen mit Delta CT

• Genotypisierung mittels HRM und Sonden-Systemen (FRET)

• Qualifizierung der RNA und cDNA, Primer-und Sonden-Design

• Analyse der geeigneten endogenen Referenz und verschiedene Auswertemethoden
  

• Troubleshooting: Integrität der RNA/cDNA, Kontamination, Anzahl und Größe der Replikate

Themen der Praxis-Schulung

• Simulierte Wasserqualitätsprüfung: Nachweis und Quantifizierung von Legionellen mittels Standardkurve (LOD, LOQ)

• Genotypisierung über HRM und Sonden-Systemen

• Präparation von RNA, cDNA-Synthese, relative Quantifizierung

• Mit den Kursdaten werden erschiedene Auswertungsmethoden demonstriert

Zielgruppe

Technische oder wissenschaftliche MitarbeiterInnen mit Grundkenntnissen in der Molekularbiologie.

Termine und Preis

Anmeldungen für offene Kurse sind derzeit Corona-bedingt noch nicht möglich. Eine Reservierung kann per E-Mail erfolgen. 

Schulungsort: Bremen

Kurssprache: Deutsch

Termin 2022: 07. bis 09. Dezember 2022

Preis: 1.079 Euro zzgl. MwSt. (1.284 inkl. MwSt.)

Die Kursgebühr bei offenen Schulungen beinhaltet die Verpflegung während des Kurses (Kaffee, Getränke, Mittagessen), sowie Schulungsunterlagen im Farbdruck und ein Teilnahme-Zertifikat nach GMP-Vorgaben.